细胞荧光计数仪原理和作用

发布日期：2022-04-22 11:09:00浏览次数：493

细胞荧光计数仪是一种先进的细胞分析仪器，具有高精度、高效率和高自动化程度等优点。它广泛应用于细胞生物学、生物医学、药物研发等领域，为科研人员提供了强有力的实验工具。本文将详细介绍细胞荧光计数仪的工作原理、应用及优势。

一、细胞荧光计数仪的工作原理

细胞荧光计数仪主要基于流式细胞术(Flow Cytometry)原理。在流式细胞术中，细胞被激发产生荧光信号，这些信号被光电倍增管收集并转换为电信号。通过高速光电倍增管和计算机系统对信号进行处理和分析，可以对细胞的各项参数进行精确测量。细胞荧光计数仪可以同时检测多个细胞参数，包括细胞大小、细胞形状、细胞表面标志物等，从而实现对细胞性质的全面分析。

二、细胞荧光计数仪的应用

1. 基础研究：细胞荧光计数仪可用于研究细胞的生理和病理过程。例如，通过对特定基因转染的细胞进行荧光标记，可以研究基因表达对细胞生长和分化的影响。此外，通过对肿瘤细胞进行荧光染色，可以观察肿瘤细胞的恶性程度和分化程度。

2. 药物研发：细胞荧光计数仪可用于药物筛选和毒性测试。通过对药物对细胞的作用进行监测和分析，可以筛选出具有疗效且副作用小的药物。此外，通过对不同种类的细胞进行荧光标记，可以研究药物在不同类型细胞中的作用机制和药效。

3. 临床诊断：细胞荧光计数仪可用于诊断感染性疾病、免疫性疾病等。例如，通过对血液样本中的淋巴细胞亚群进行分析，有助于诊断免疫系统疾病;通过对病原微生物进行荧光标记，可以快速检测出病原体，为临床诊断提供有力支持。

4. 细胞免疫治疗：细胞荧光计数仪可用于监测和评估细胞免疫治疗的效果。在细胞免疫治疗中，通常需要使用荧光染色技术对免疫细胞进行标记和追踪，以评估治疗效果和安全性。

三、细胞荧光计数仪的优势

1. 高精度：细胞荧光计数仪采用先进的激光照射和光电倍增技术，可以对细胞进行高精度的多参数分析，提高实验结果的准确性。

2. 高速度：细胞荧光计数仪具有高效的数据处理和分析能力，可以快速处理大量数据，提高实验效率。

3. 多功能：细胞荧光计数仪可以同时检测多个细胞参数，并且可以结合其他技术手段进行综合分析，为科研人员提供了更多的实验信息。

4. 自动化：细胞荧光计数仪具有高度自动化的特点，可以减少人工操作误差，提高实验的一致性和可重复性。

5. 可靠性：细胞荧光计数仪经过严格的质量控制和长时间的临床验证，具有较高的可靠性和稳定性，可以为科研人员提供可靠的实验结果。

总之，细胞荧光计数仪作为一种现代化的细胞分析工具，具有广泛的应用前景和重要的科研价值。通过了解其工作原理、应用及优势，我们可以更好地认识这一重要的实验仪器，并为科研工作提供有力支持。

AO/PI 双荧光计数法是对传统的台盼蓝和 MTT 测试方法的优化与替代。AO/PI 试剂由 DNA 结合染料吖啶橙(Acridine Orange，简称 AO)和碘化丙啶(Propidium iodide，简称 PI)组成。其中 AO 可以通过完整的细胞膜，嵌入所有细胞(活细胞和死细胞)的细胞核，呈现绿色荧光;PI 只能通过不完整的细胞膜，即死细胞的细胞膜，嵌入所有死细胞的细胞核，呈现红色荧光。当两种染料均存在于细胞核内时，在合适的 AO、PI 配比下，两种染料发生能量共振转移，死细胞在绿色通道激发出红色荧光。由于 AO 和 PI 为 DNA 结合染料，因此可有效排除杂质以及红细胞的干扰，确保对样品进行准确计数。

Countstar Mira FL 系列全自动细胞荧光分析仪可采用AO/PI 双荧光检测的方法，对细胞进行活率、大小和数量的检查。

Countstar Mira对 CHO 细胞进行AO/PI 双荧光检测：