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双荧光法分析血液和原代细胞
摘要
血液、新鲜分离的原代细胞或培养的细胞可能会含有杂质、红细胞或细胞碎片等干扰颗粒，这使得传统的台盼蓝方法无法分析目标细胞。基于双荧光方法分析的Countstar Rigel可以排除细胞碎片、杂质、干扰颗粒以及血小板等尺寸过小的物质，从而得到高度准确的结果。
介绍
- AO/PI双荧光活率计数
- 全血中白细胞（WBC）的分析
- 外周血单个核细胞（PBMC）的浓度和活率分析
AO/PI双荧光活率计数
图1 Countstar Rigel AO/PI双荧光活率计数操作步骤
吖啶橙（AO）和碘化丙啶（PI）是细胞核的核酸结合染料。因此AO/PI双荧光分析方法能够排除细胞碎片、杂质、干扰颗粒以及红细胞等尺寸过小的物质，从而得到高度准确的结果。
全血中白细胞（WBC）分析
图2 Countstar Rigel拍摄的全血样本图像
全血中白细胞的分析是临床实验室或血库中的常规检测。白细胞的浓度和活率是血液储存质量控制的重要指标。基于AO/PI双荧光方法的Countstar Rigel可以准确区分细胞的死活状态，并能够排除红细胞的干扰。
外周血单个核细胞（PBMC）的浓度和活率分析
图3 Countstar Rigel拍摄的PBMC的明场图像和荧光图像
AO/PI双荧光计数法用来检测细胞浓度和活率。因此，在Countstar Rigel系统中，具有完整细胞膜的有核细胞染绿色荧光并被计为活细胞，而具有受损细胞膜的有核细胞染红色荧光并被计为死细胞。红细胞、血小板和碎片等无核物质不发荧光并被Countstar Rigel系统忽略。