艾力特广州站|免疫治疗药物研发进展论坛圆满完成!

发布日期:2019-06-28 10:00:00浏览次数:175

国内细胞治疗以药品形式申报的势头正在快速增长,以药品的监管模式来管理细胞治疗在国内也越来越清晰。而生物类似药热度也一直居高不下,我国抗体药物的发展速度也已今非昔比。

在此背景下,艾力特生命科学与生物制品圈和抗体圈再一次联手,于2019年6月21日(周五)在广州举办了主题为免疫治疗药物研发进展交流会,本次会议以免疫治疗药物的研发进展为主题,8位演讲嘉宾和100多位来自各代表企业的听众齐聚一堂,一起分析和探讨免疫治疗药物研发进展中的机遇和挑战。

此次论坛的演讲内容包括:CAR-T细胞“制导”精准杀癌——一种可调控的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)及其在实体瘤免疫治疗中的应用、纳米抗体技术平台的应用、计算模拟在抗体研发中的应用、行业巨变下单抗药物研发企业的创新之路、早期治疗性抗体候选物可开发性评估、H2L2平台在全人源抗体中的应用、基于细胞治疗行业的GMP质量体系和验证管理等,内容丰富多彩,精彩纷呈,是一次难得的学习之旅和分享盛宴!

这次会议的成功举办离不开业内朋友们的支持和信任,在此,艾力特再次对大家的关注表示感谢,希望在生命科学的赛道上我们继续并肩前行!

艾力特作为为生命科学和生物技术行业提供先进的仪器设备、技术以及服务,感恩所有的生物制药行业客户,是您们的信任和支持,让艾力特生命科学发展为集研发生产,进口设备代理为一体的高科技公司。感谢您们的一路相伴,艾力特人将一如既往的为生物制药产业提供先进的工艺设备和技术解决方案及服务。

9年前,艾力特售出中国第一台ATF灌流设备。今天,5个基于ATF技术的产品进入临床III期并即将商业化。全国超过30家公司正在基于ATF开发灌流和浓缩批次工艺,药明生物成为全球最大的ATF灌流技术平台之一,中国最大的基于3000L生物反应器的灌流生产线即将建成。

今天,中国免疫治疗行业进入商业化进程的新篇章!超过100家生物制药客户正在使用艾力特提供的工艺过程监控和检查设备,超过20家抗体生物制药企业正使用艾力特提供的符合FDA,EU-GMP要求的蒸汽灭菌,VHP空间灭菌等相关设备和服务,超过100家免疫治疗的客户正使用我们研发生产的CounrtStar细胞分析仪。

在中国免疫治疗药物产业化发展的道路上,艾力特将一如既往,砥砺前行,把最好的服务最好的产品带给免疫治疗行业。

随着新版GMP的实施和推广,我国对无菌药品的生产提出了更高的要求。尤其是随着生物制药的快速发展,Single Use 技术越来越被广泛应用,厂房布局也越来越灵活,空间灭菌一直以来都是生物制药生产过程中的关键环节,为了提高产品的质量,选择合适的灭菌方式就显得尤为重要。在当前各种灭菌技术当中,干法汽化过氧化氢(VHP)灭菌被公认为最理想的灭菌方式。VHP灭菌方式正迅速成为生物制药行业尤其是抗体、CAR-T、干细胞等领域生物净化的新选择,其可将无菌保证水平(SAL)降低至10-6水平以下。

Geschko 汽化过氧化氢发生器是德国 PEA 独立开发的可用于洁净室、传递窗和隔离器等密闭空间灭菌的设备,也可集成到空调系统进行灭菌。

该发生器采用第三代干法闪蒸技术,产生的过氧化氢气体杀菌能力强,不容易在物体表面凝结,具有良好的材料兼容性;移动式主机可灵活部署,配置分布降解系统可增加灭菌体积,加速灭菌循环;灭菌过程自动化监控,洁净设计、数据完整性等符合GMP法规要求。

细胞治疗,将改变人类疾病的治疗范式,由过去重复的症状控制转为一次性的治愈,是引领生物医学的希望。其中,嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法是近年来发展非常迅速的一种细胞治疗技术。浓度、活率对于CAR-T整个生产过程非常重要,艾力特自主研发生产的Countstar Rigel荧光细胞分析仪在智能、精准、合规方面满足您对细胞计数仪所有的想象和需求。

01

不同行业中台盼蓝计数的痛点

1)  细胞治疗领域

台盼蓝计数:PBMC分离后,需要进行分离效果的测试,指标有浓度,活率,这些指标用于指导下一步的实验操作。但目前梯度离心分离过程中,会有红细胞的残留,而红细胞的大小与PBMC接近,且台盼蓝拒染,也就是传统的台盼蓝方法不能分辨红细胞与活的PBMC,造成浓度与活率的差异(见Figure1中的图片)

Figure1

2) 发酵生产(抗体药)领域

CHO细胞在发酵后期,会有很多细胞碎片和杂质产生,台盼蓝染色无法进行准确的活率,浓度计数(见Figure2中的图片)。浓度,活率指标对于发酵终点的确定是重要的参考依据。

Figure2


3)干细胞领域

原代间充质干细胞在分离的时候,会有大量的杂质产生,造成对目标细胞分析的干扰(见Figure3中的图片)。但原代细胞分离效果的确定对于后面实验至关重要,有些分离效果很差或者未分离到间充质干细胞的样本,需要做不同的处理策略。


Figure3


02

AO/PI计数解决台盼蓝计数的痛点

1)AO/PI双荧光方法对PBMC细胞计数

Countstar优化了的双荧光染色方法,可以简单,准确地测定PBMC浓度和活力。用AO/ PI染色的样品可用Counstar Rigel分析,CountstarRigel使用预先优化设置对PBMC进行浓度活率分析。AO/PI方法可以精准区分死细胞和活细胞,并且能排除无核细胞的干扰。

Figure4 Countstar Rigel对PBMC进行细胞活率计数分析

2)分析新鲜临床样品中的TNC活率

由于新鲜的临床样品含有非常高百分比的血小板和红血细胞,在明场下TNC很难被区分出来。在一些实验室中,样品被裂解用于TNC分析,但不能确定细胞活力。AO/ PI双荧光方法在无需裂解红细胞的情况下可轻松测量新鲜临床样品如骨髓,脐带血和外周血中的TNC浓度和活力。

Figure5Countstar Rigel对未裂红的样机进行计数

3)运输前后的ASCs细胞AO/PI及台盼蓝计数活率对比结果

结论:运输前细胞状态好,台盼蓝与AO/PI计数结果无明显差异;运输后的细胞样本,台盼蓝计数结果与运输前无明显差异,但是AOPI计数结果明显低于台盼蓝计数。

不管是培养过程中还是运输前的状态比较好的细胞样本,台盼蓝计数与AO/PI荧光计数结果细胞活率保持一致;但对于冻存复苏及运输后复苏的样本,AO/PI活率明显比台盼蓝计数结果低。类似的实验结果在很多地方得到验证,活率计算结果差异大小依据冻存效果不同有所波动。所以选择countstar Rigel AO/PI荧光方法计数能更精确的区分冻存复苏细胞死活,从而反映更加真实的细胞活力状态。

        2018年9月,美国药典(USP-NF)出台了关于细胞冷冻保存的政策,文中明确提出,对于冻存复苏的样本,类似于台盼蓝的染料来检测细胞完整性的方法用的越来越少,因为其不能很好的辨别冻存和复苏的细胞,这种检测方法经常需要特定细胞种类并且指定合适的浓度和时间。当下荧光染料越来越多的应用于复苏细胞的浓度活率检测。USP-NF建议至少选用两种方法对复苏后的细胞进行活率检测。详情请参考《USPGeneral Chapter <1044> Cryopreservation of Cells》

        目前台盼蓝计数还是市场上主流的细胞计数方法。 但在细胞治疗行业,需要测量原代细胞已经冻存复苏的细胞,台盼蓝的技术原理已经不能满足其需求,双荧光AO/PI计数的方法变得越来越普及。


(PS: 仅限于研究用途, 不可用于诊断操作)