Countstar Rigel智能细胞分析仪应用之干细胞领域

发布日期:2019-11-29 09:59:00浏览次数:72

干细胞是具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞,是机体的起源细胞, 是形成人体各种组织器官的原始细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞或组织器官,医学界称其为“万用细胞”。近年来,干细胞产业发展迅猛,实现临床转化步伐在加快, 干细胞产品质量是行业发展的基石,只有先进的细胞技术,严苛的细胞质量控制,才能为高品质细胞资源提供强有力的保障。Countstar细胞分析仪可以根据不同客户需求为干细胞研究和产业化的质量控制提供有力的支持。下面概述countstar分析仪应用于干细胞领域的几个方面。

01

干细胞存活率及生长活性检测

干细胞的采集、分离、纯化、扩增和细胞(系)的建立及保存、运输等过程中,细胞浓度及生长活性检测都是非常重要的。目前,市面上用于干细胞计数和活力分析的方法主要有台盼蓝染色法、电阻抗法及荧光染色法。我们countstar可以为大家同时提供台盼蓝染色法及AO/PI荧光染色两种方法来为大家解决不同状态的干细胞样本计数问题。下面我们把不同状态样本分为以下几种情况。

1.纯培养无杂质的干细胞样本

图1 培养过程中MSCs细胞台盼蓝染色及AOPI染色活率数据及图片结果


2.冻存复苏的样本

图2 运输前后ASCs细胞台盼蓝染色及AOPI染色活率数据及图片结果


3.原代的干细胞样本

图3 原代MSC细胞台盼蓝染色及AOPI染色图片结果

综上,对于台盼蓝与荧光染色两种方法,对于状态比较好的细胞系,两种方法都可以得到比较可靠的数据,但是对于冻存复苏的样本,双荧光染色更能反映样本的真实状态;对于原代的细胞样本,因为荧光染料核酸特异性染色,可以有效排除组织杂质及碎片干扰。

02

干细胞纯度及均一性检测

通过检测细胞表面标志物、遗传多态性及特定生物学活性等,对制剂进行细胞纯度或均一性的检测。对胚胎干细胞及iPS细胞植入人体前的终末诱导分化产物,必须进行细胞纯度和/或分化均一性的检测。对于需要混合使用的干细胞制剂,需对各独立细胞来源之间细胞表面标志物、细胞活性、纯度和生物学活性均一性进行检验和控制。下面我们countstar可以从形态学改变及CD分子表面标志物检测两个方面进行检测。

图4 AdMSCs运输前后形态学改变图片及结团率与直径变化对比示意图


图5 脐带间充质干细胞表型分析图片及FCS express类流式分析结果

03

合规性

目前,市面上用于干细胞计数和活力分析的方法主要有显微镜手工计数法和细胞计数仪自动计数法。而随着大家对质量要求的增高,测试方法能否完美符合FDA 21 CFR Part11及GMP的要求就至关重要。我们可以为客户提供符合FDA 21 CFR Part 11要求的安全用户登录系统、多级用户管理权限及审计追踪,同时可以为客户提供3Q验证服务,以及可对接或定制符合GMP要求的云端或者实验室管理系统实现对数据的管理。Countstar合规性如下图所示。

图6 Countstar Rigel用户登录、多级管理权限及审计追踪模块


图7 Countstar Rigel标准微珠颗粒及3Q验证文件


图8 Countstar Rigel连接实验室云端或实验室管理系统示意图