Countstar在疫苗生产中的应用

发布日期:2019-03-29 23:58:00浏览次数:239

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疫苗行业简述


疫苗,是为了预防、控制传染病的发生、流行,用于人体预防接种的疫苗类预防性生物制品。疫苗可有效预防疾病,减少医保费用支出,效费比高于药品等其他医保负担项目,是各个国家大力扶持的行业。由于其安全要求高于一般药品,整个疫苗行业从研发、生产到流通、销售和售后反馈环节受到非常严格的监管。疫苗仍是主要的控制和预防传染病的手段。近年来,全球疫苗行业发展迅速,2017年市场规模突破300亿美元,2018年疫苗销售规模将进一步增长,达到约323亿美元。

2013-2018年全球疫苗历年销售总额情况

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Countstar细胞分析仪在疫苗生产中的应用


病毒疫苗制备有赖于细胞的培养,细胞生长的好坏直接影响疫苗的质量和产量。疫苗生产的工艺示意图:


疫苗生产中的细胞库包括原始细胞库(PCB)和主细胞库(MCB)和工作细胞库(WBC)。这些细胞库通常使用超低温冰箱或液氮罐保藏种子细胞,一般实验室使用50L的液氮罐,再配置1-2个10L的运输罐。从主细胞库中取一定数量的细胞制备工作细胞库(WCB)。

原始细胞库由一个原始细胞群体发展成传代稳定的细胞群体,或经过克隆培养而形成的均一细胞群体,通过检定证明适用于生物制品生产或检定。在特定条件下,将一定数量、成分均一的细胞悬液,定量均匀分装于安瓶或冻存管,于液氮或-130℃以下冻存,即为原始细胞库,供主细胞库建立使用。

主细胞库取自原始细胞库细胞,通过一定方式进行传代、增殖后均匀混合成一批,定量分装,保存于液氮或-130℃以下。这些细胞必须按其特定的质控要求进行全面检定,应合格。主细胞库用于工作细胞的制备。

工作细胞库由主细胞库细胞传代扩增制成。达到一定代次水平的细胞,合并后制成一批均质细胞悬液,定量分装于安瓶或适宜的细胞冻存管,保存于液氮或-130℃以下备用,即为工作细胞库。

病毒疫苗生产中需要预先准备大量的动物细胞,然后接种疫苗生产用的标准毒种,适当培养若干时间后,收获细胞培养物,分离纯化后的病毒便是病毒疫苗生产使用的直接或间接原料。

Countstar细胞分析仪应用于病毒收获之前的每一流程。细胞库的每次传代,以及在发酵罐内进行细胞扩增时,Countstar细胞分析仪能够帮助确定细胞生长状态,细胞密度和活性,以计算传代比例。在工艺控制中,可根据发酵罐的工作体积,确定合适的细胞密度。如果接种到发酵罐的细胞密度,密度过高,容易导致基质不均匀,细胞生长不同步,凋亡快;密度过低,空间利用率低,细胞生长到一定规模需要更长时间,难以保证细胞代次。所以准确的细胞计数,浓度与活率的监测是保证培养成功的重要指标。


a.长春市某疫苗企业利用荧光染色法对人二倍体细胞进行检测,数据如下:


b.沈阳某疫苗企业对生产用Vero细胞浓度与活率稳定性检测

Countstar Rigel计算的细胞活率CV值为0.23%,总细胞浓度CV值为2.32%,活细胞浓度CV值为2.14%,均在误差范围5%以下。


c.吉林某疫苗企业检测200L发酵罐 sf9细胞样本图片

以上案例均是疫苗生产企业的真实数据反馈,在疫苗的生产过程中,Countstar Rigel细胞分析仪具有很好的稳定性和重复性;运用图像法检测,智能图像分析,有图像有数据,方便直观;更拥有多级用户管理权限,符合GMP要求及FDA 21CFR Part11,确保数据的安全性、可追溯性,达到对疫苗的质量控制。