CAR-T细胞治疗质量控制浅谈

发布日期:2018-05-16 09:14:17浏览次数:555

细胞治疗,将改变人类疾病的治疗方式,由过去重复的症状控制转为一次性的治愈,是引领生物医学的希望。其中,嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法是近年来发展非常迅速的一种细胞治疗技术。

目前在全球已有两款药物获得FDA的批准上市,分别是诺华的Kymriah和凯特的YESCARTA,中国有多家公司产品进入临床申报或处于已获批阶段,这种疗法已成为更多患者的选择,CAR-T细胞制造过程符合全球监管要求成为广泛讨论的话题。

细胞治疗质量控制分析

其中细胞质量控制贯穿CAR-T从研发到临床的所有步骤,但CAR-T作为“活”的药物,其很多特性与传统药物有很大的差别,下表列举了与传统药物的主要差异点:

第一个上市的CAR-T药物Kymriah的释放标准涉及到多个方面的指标,下图是小编收集到的Kymriah的释放指标所需要测试的实验:

KITE的YESCARTA的质量控制也涉及到非常多的生物学实验,篇幅有限,就不一一列举了,具体指标可参考如下的链接:

https://www.fda.gov/downloads/BiologicsBloodVaccines/CellularGeneTherapyProducts/ApprovedProducts/UCM584335.pdf

另一方面CAR-T制造工艺复杂,下图列举了CAR-T的制作流程,其中涉及到病毒转染,外源物质的引进,长时间培养等因素,这势必对质量控制提出了巨大的挑战。

细胞治疗质量控制原则及法规

基于以上原因,CAR-T细胞质量控制特别强调制备工艺的稳定性、多批次验证、全程质控和按照SOP严格操作。要建立稳定的质量检验和放行检验标准。

美国和欧洲出台了相应的法规来规范细胞治疗的质量控制,以下是国外针对细胞治疗出台的相关政策法规:

(大家如有需要,可至文末邮件索取资料)

在我国,细胞治疗的国家主管部门是国家卫生和计划生育委员会(NHFPC)和国家食品药品监督管理总局(CFDA),下图是我国针对细胞治疗出台的相关政策法规:

以下以CTL019为例来分析细胞治疗质量控制策略,目前细胞治疗产品的质量控制分为四个大的方面,分别为安全性(Safety),纯度(Purity),潜能性(Potency)以及均一性(Identity),这些质量控制会贯穿CAR-T生产的不同阶段,下图列举了这些检测会在不同的阶段开展。

这四个大方面的检测再进行细分,具体的实验如下图:

生物学实验用于质量分析带来的挑战

在这些实验中,大部分是生物学实验,生物学实验因为操作方法,样本差异等因素会给结果带来较大的波动,也给这些方法向GMP转移带来了挑战,同时这些实验结果的验收标准和规范难以制定,以CAR-T的转染效率测定为例,不同的人对流式细胞仪结果设门得到的差异会有较大的差异。

细胞治疗质量控制的基石实验---浓度、活率

细胞浓度活率测试方面,其是很多生物学实验的基础,比如细胞生长速率测定,细胞因子检测,细胞生物学效应检测方面,细胞计数是这些实验的第一步,这一步如果错误,那么结果波动大是预料之中的。另外在在细胞培养过程中,极为重要的一点是优化细胞培养条件。细胞的浓度,活率,结团率,形态是了解反应器中细胞培养状态的重要指标。总而言之,CAR-T从细胞收集开始到最后的产品回输,浓度活率一直是最关键的指标之一。

既然浓度活率对于CAR-T整个生产过程这么的重要,小编自作主张的调研和试用了市场上最畅销的几款细胞计数仪,尤其衷爱我国自主研发生产的Countstar Rigel荧光细胞分析仪。不得不说,这款产品的智能、精准、合规满足了小编对细胞计数仪所有的想象。


智能


作为新时代年轻人,触屏的使用已经深入人心,这款产品的设计也让小编有告别传统PC时代,与科技进步共发展的认同感。

只需动一动手指,即可全自动获得细胞分析结果和图像。高质量的图像可通过多点触控放大或缩小,让你看得真切,让小编对结果的真实性不再怀疑。三分钟检测五个样,用这样的神器,老板再也不用担心我的计数速度啦。正是这款小小的荧光细胞分析仪其实具有大智慧。除细胞浓度活率检测外,对于CarT细胞中效应细胞毒性、细胞凋亡等测试这款仪器也能进行很好的分析。

精准


小编亲测,使用AOPI活率检测程序测试细胞浓度和活率,看一遍即会使用,5槽测试结果CV<5%,线性R2>0.99,多台仪器间测试结果一致。多个地区,多类样品,多个人开展测试,也不再担心数据的一致性。

Countstar Rigel 的AOPI细胞活率测试,可用于全血的质量评估,PBMC分离效率检测,T细胞的培养状态,T细胞的增殖率和活率,产品释放质量控制,在CarT细胞治疗整个质量控制过程均可使用。

合规


从美国药典,FDA以及CFDA的法规来看,对细胞治疗产品用于药品,符合GMP规范进行管理成为未来的趋势。所以,小编对仪器最重要最基本的要求就是需要符合GMP/cGMP、数据审计追踪、FDA 21 CFR PART 11。Countstar Rigel从设计到服务完全符合这个要求!同时,Countstar Rigel提供标准微珠颗粒、3Q验证服务,并且经SGS专业测试验证,符合ISO14644 Class5(GMP B级)环境使用要求。可以在GMP B+A级洁净环境下放心使用。

据了解,Countstar(IC1000,BioMed)在全球已销售2000多台,在细胞治疗行业有超过200个客户,有超过10家用户正在进行临床申请。Countstar 9年只做一件事,努力做最好的荧光细胞分析仪。Countstar Rigel是值得期待的,必以势如破竹之势,让细胞质量控制迈入智能时代,成为细胞治疗“行业首选”。